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    MR-VP生化鑒定管的原理及使用方法

    張立鑫
    錄入時間:2024-9-13 16:59:52 來源:青島海博生物


    一、產品用途及原理

      用途:用于大腸埃希氏菌、O157菌、單增李斯特氏菌、腸桿菌科等的生化鑒定。

      添加劑:每盒需配套1盒甲基紅試劑盒HB8280與1盒V-P試劑盒HB8281使用。

      原理:䏡胨提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵的糖類;磷酸氫二鉀是緩沖劑。

    MR實驗中,不同細菌分解葡萄糖的產物不同,大腸埃希氏菌、單增李斯特氏菌可分解葡萄糖產生大量酸,使pH值下降到4.5以下,滴入甲基紅顯紅色,即為MR陽性;產氣腸桿菌產酸較少,滴入甲基紅顯橙黃色。

    V-P實驗中產氣腸桿菌、單增李特氏菌分解葡萄糖產生丙酮酸,并使丙酮酸脫羧,生成中性的乙酰甲基甲醇,在堿性溶液中被空氣氧化生成二乙酰,繼續與培養基中的胍基反應生成紅色化合物,即為V-P陽性。


    二、培養基配方(g/L)

    䏡胨

    7.0

    葡萄糖

    5.0

    磷酸氫二鉀

    5.0

    pH值6.9±0.2(25℃)


    三、試驗方法

      1、取適量培養物制備菌懸液,接種于MR-VP生化管中,36℃±1℃培養24h-48h。

      2、甲基紅(MR)試驗

    按照甲基紅試劑盒說明書滴加甲基紅試劑,立即觀察結果。鮮紅色為陽性,黃色為陰性。

      3、V-P試驗

      按照V-P試劑盒說明書滴加V-P試劑,充分振搖生化管,觀察結果。陽性反應立刻或于數分鐘內出現紅色,如為陰性,應放在36℃±1℃繼續培養4h再進行觀察。


    四、質控結果

      接種以下質控菌株,放置于36℃±1℃需氧培養24h-48h。結果如圖1。

    質控菌株

    菌株編號

    接種量(CFU)

    方法

    質控結果

    大腸埃希氏菌

    ATCC 25922

    >5000

    定性

    MR:+(變紅);VP:-

    單增李斯特氏菌

    ATCC 19114

    >5000

    定性

    MR:+(變紅);VP:+(變紅)

    普通變形桿菌

    ATCC 13355

    >5000

    定性

    MR:+(變紅);VP:-

    產氣腸桿菌

    ATCC 13048

    >5000

    定性

    MR:-;VP:+(變紅)

    大腸埃希氏菌O157

    ATCC 35150

    >5000

    定性

    MR:+(變紅);VP:-

      培養24h:

      培養32h:

      培養40h:

      培養44h:

      培養48h:

      培養52h:

    圖1 MR-VP生化鑒定管微生物質控結果

    由圖1所示,接種質控菌液后培養24h至52h的生化鑒定結果均相同。


    相關產品:


    MR-VP培養基-點擊查看產品詳情

    甲基紅試劑盒-點擊查看產品詳情

    V-P試劑盒-點擊查看產品詳情



    注:本文屬海博生物原創,未經允許不得轉載。

     

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